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400-021-2021
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細胞又雙叒叕污染了，莫慌，幫您拯救珍貴細胞！
更新更新時(shí)間：2021-04-29 瀏覽次數：3185
在細胞培養過(guò)程中，廣大科研工作者一直飽受微生物污染的困擾，幾乎所有科研單位的細胞房都曾經(jīng)遭受過(guò)細菌、真菌、支原體、黑膠蟲(chóng)的污染，尤其是一些珍貴的細胞種子，一 旦招惹上這幾個(gè)家伙，甚至面臨“絕種”的危險。針對細胞培養當中面臨的普遍的問(wèn)題，作為科研工作者的我們必須清楚認識這些微生物，并通過(guò)技術(shù)手段判斷細胞遭受了哪種污染， 準確的對癥下藥，才能為我們的細胞保駕護航。
1 細菌污染
1.1 細菌污染的鑒別
細菌污染是細胞培養當中最常出現的污染類(lèi)型，槍頭不小心碰到瓶壁、手不小心從培養瓶口處穿過(guò)、培養基倒入培養瓶等等，不經(jīng)意的一個(gè)小動(dòng)作，都可能會(huì )造成細菌污染，以致于實(shí)驗前功盡棄。 細菌污染在沒(méi)有爆發(fā)或培養體系中含有雙抗時(shí)，細菌污染較容易被科研工作者忽視，黑點(diǎn)在顯微鏡下一穿而過(guò)，小黑點(diǎn)因為數量少且移動(dòng)迅速而不易發(fā)現。隨著(zhù)細菌在培養體系中的增多或者體系中撤掉雙抗以后，細菌可以從鏡下明顯識別，會(huì )呈現黑色條狀、棒狀、球狀， 培養基的外觀(guān)也會(huì )發(fā)生明顯的變化，培養基變渾濁，有細沙狀沉淀，有時(shí)會(huì )伴有臭味。
1.2 細菌污染的解決方式
一般的細胞培養體系中，普遍采用雙抗或者三抗進(jìn)行細菌的預防，但這兩者存在一定的局限性，比如只能預防，而不能拯救已經(jīng)細菌污染的細胞。另外，很多科研工作者從事原代的細胞分離和培養工作，在從動(dòng)物身上取材并分離培養的過(guò)程中，極易造成細菌污染，如果只是加入雙抗或三抗進(jìn)行沖洗組織，細菌污染無(wú)法避免，造成了珍貴動(dòng)物組織的浪費。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）細胞污染高效清除劑
iCell 細胞污染高效清除劑，不僅兼具雙抗或三抗預防細菌的功效，還可以清除支原體污染，有效消除真菌和細菌的污染，只需 1-3 天就可顯著(zhù)抑制支原體、真菌、細菌的增殖， 本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了上百種細胞的測試和長(cháng)期的實(shí)驗驗證，兼具高效和廣譜清除細胞污染物的能力，對細胞生長(cháng)幾乎無(wú)影響，大程度上挽救您的細胞。
2.真菌污染
2.真菌污染
2.1 真菌污染的鑒別
實(shí)驗室污染的真菌一般為三類(lèi)：念珠菌、酵母菌、霉菌，細胞污染真菌通常不易察覺(jué)，只有霉菌會(huì )逐漸出現細絲團狀漂浮物，較容易從外觀(guān)發(fā)覺(jué)污染，其他真菌污染不像細菌污染培養基會(huì )渾濁，污染后培養液清澈透亮，與未污染的細胞從外觀(guān)上看無(wú)明顯變化。
在顯微鏡下比較容易判斷污染類(lèi)型，念珠菌呈卵圓狀，在細胞周邊生長(cháng)，酵母菌出芽生殖時(shí)有明顯的一大一小連體結構，霉菌可觀(guān)察到菌體，菌絲呈絲狀、管狀、樹(shù)枝狀。
在顯微鏡下比較容易判斷污染類(lèi)型，念珠菌呈卵圓狀，在細胞周邊生長(cháng)，酵母菌出芽生殖時(shí)有明顯的一大一小連體結構，霉菌可觀(guān)察到菌體，菌絲呈絲狀、管狀、樹(shù)枝狀。
2.2 真菌污染的解決方式
真菌污染由于不容易通過(guò)培養基的變化來(lái)判斷，一般發(fā)現時(shí)就是已經(jīng)爆發(fā)了，鏡下會(huì )出現明顯團狀或黑色絲狀污染物，細胞狀態(tài)明顯變差，很難救活。傳統的預防真菌污染的方式為培養體系中加入三抗，但是一旦發(fā)生真菌污染，三抗對于明顯的真菌污染就顯得心有余而力不足，此時(shí)建議如果是還留存種子的細胞就立刻扔掉，*消毒滅菌細胞房和 CO2 培養箱，扔掉可能被污染的培養基，對用過(guò)的實(shí)驗器材進(jìn)行滅菌。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）真菌清除劑
真菌清除劑用于防止細胞培養過(guò)程中的真菌（包括酵母）污染，還可用于消除細胞培養物中的真菌（含酵母）污染。療效遠超真菌抗生素兩性霉素 B，對細胞培養過(guò)程中的真菌污染，如白色念珠菌、曲霉、酵母有很好的療效。
真菌清除試劑經(jīng)過(guò)了上百種細胞的測試和長(cháng)期的實(shí)驗驗證，只需 1-3 天就可以抑制真菌增長(cháng)。對細胞基本無(wú)害，具有高效、特異性殺滅的特點(diǎn)，大程度上挽救珍貴的細胞，減少真菌污染帶來(lái)的損失。
3 黑膠蟲(chóng)污染
3.1 黑膠蟲(chóng)污染的鑒別
“黑膠蟲(chóng)”是一種常見(jiàn)的細胞污染物，與細胞共生，隨細胞傳代而傳代。“黑膠蟲(chóng)”與細胞競爭性生長(cháng)，對細胞生長(cháng)不利，嚴重時(shí)導致細胞死亡。目前很多細胞存在被“黑膠蟲(chóng)”污染的現象，對細胞培養及其后續實(shí)驗造成了極大地影響。
“黑膠蟲(chóng)”污染的細胞常見(jiàn)的特性有以下幾點(diǎn)：
（1）培養基不渾濁，但在顯微鏡下觀(guān)察細胞時(shí)，細胞周?chē)团囵B液中有很多“小黑點(diǎn)”， 且隨著(zhù)培養時(shí)間的延長(cháng)“小黑點(diǎn)”逐漸增多，更換培養液或洗滌細胞不能將其去除；
（2）“黑膠蟲(chóng)”污染的細胞，營(yíng)養消耗快，需要頻繁更換培養液；
（3）“黑膠蟲(chóng)”污染的細胞生長(cháng)緩慢，細胞狀態(tài)差，空泡化嚴重，甚至還可能導致細胞形態(tài)的改變。
“黑膠蟲(chóng)”污染的細胞常見(jiàn)的特性有以下幾點(diǎn)：
（1）培養基不渾濁，但在顯微鏡下觀(guān)察細胞時(shí)，細胞周?chē)团囵B液中有很多“小黑點(diǎn)”， 且隨著(zhù)培養時(shí)間的延長(cháng)“小黑點(diǎn)”逐漸增多，更換培養液或洗滌細胞不能將其去除；
（2）“黑膠蟲(chóng)”污染的細胞，營(yíng)養消耗快，需要頻繁更換培養液；
（3）“黑膠蟲(chóng)”污染的細胞生長(cháng)緩慢，細胞狀態(tài)差，空泡化嚴重，甚至還可能導致細胞形態(tài)的改變。
3.2 黑膠蟲(chóng)污染的解決方式
對于黑膠蟲(chóng)污染的細胞，最為快速有效的處理方式就是采用黑膠蟲(chóng)清除劑對黑膠蟲(chóng)進(jìn)行清除，同時(shí)確保培養體系中的血清必須為無(wú)黑膠蟲(chóng)和原蟲(chóng)污染的優(yōu)質(zhì)血清。
對于黑膠蟲(chóng)污染的細胞，最為快速有效的處理方式就是采用黑膠蟲(chóng)清除劑對黑膠蟲(chóng)進(jìn)行清除，同時(shí)確保培養體系中的血清必須為無(wú)黑膠蟲(chóng)和原蟲(chóng)污染的優(yōu)質(zhì)血清。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）黑膠蟲(chóng)清除劑
黑膠蟲(chóng)清除試劑用于清除細胞培養過(guò)程中產(chǎn)生的“黑點(diǎn)”，只需 1-3 天就可以顯著(zhù)抑制“黑點(diǎn)”生長(cháng)，一周左右即可清除“黑點(diǎn)”。
本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了上百種細胞的測試和長(cháng)期的實(shí)驗驗證，對細胞生長(cháng)無(wú)明顯影響，具有高效、特異性殺滅的特點(diǎn)，可顯著(zhù)清除黑膠蟲(chóng)污染，大程度上挽救珍貴的細胞。
黑膠蟲(chóng)清除案例
4 支原體污染
4.1 支原體污染的鑒別
支原體直徑約為 0.1-0.3 μm，具有變形能力，可透過(guò)常見(jiàn)過(guò)濾膜（0.22-0.45 μm），因此常規的無(wú)菌過(guò)濾方法不能將其去除，常用的抗生素也對支原體無(wú)效。
支原體污染是細胞培養領(lǐng)域的一個(gè)世界性問(wèn)題，世界各國細胞系支原體污染的平均比例為 30-60%。支原體可通過(guò)細胞之間交叉污染，操作人員的口腔、皮膚造成污染，或者血清等添加物而帶入污染。
支原體污染是細胞培養領(lǐng)域的一個(gè)世界性問(wèn)題，世界各國細胞系支原體污染的平均比例為 30-60%。支原體可通過(guò)細胞之間交叉污染，操作人員的口腔、皮膚造成污染，或者血清等添加物而帶入污染。
支原體在光學(xué)顯微鏡下不可見(jiàn)，一般不會(huì )引起培養物混濁，因此細胞被支原體污染一般難以察覺(jué)。
支原體會(huì )消耗必須氨基酸，影響細胞生長(cháng)速率，促進(jìn)代謝物積累，改變細胞形態(tài)，影響 DNA、RNA 以及蛋白質(zhì)的合成，抑制細胞因子表達，改變被污染細胞的基因表達譜，誘導染色體畸變。
支原體會(huì )消耗必須氨基酸，影響細胞生長(cháng)速率，促進(jìn)代謝物積累，改變細胞形態(tài)，影響 DNA、RNA 以及蛋白質(zhì)的合成，抑制細胞因子表達，改變被污染細胞的基因表達譜，誘導染色體畸變。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）支原體 PCR 檢測試劑盒
支原體 PCR 檢測試劑盒是優(yōu)選直擴式 PCR 酶擴增支原體基因組中保守 16SrDNA 而設計的，不會(huì )擴增細菌等其他基因組，兼具特異性和高靈敏性的特點(diǎn)，且本試劑盒檢測范圍廣，可檢測：(1)M.Hyorhinis，(2)M.Fermentans，(3)M.Arginini，(4)M. hominis，(5)M. orale，(6)M. salivarium，(7)M.pirum，(8)Acholeplasma Laidlawii，(9)M. agalactiae， (10)M.bovis，(11)M. buccale，(12)M. arthritidis，(13)M. pulmonis 等幾乎所有常見(jiàn)的污染細胞的支原體(注：M.為 Mycoplasma 的縮寫(xiě))。
以上 13 種支原體約占細胞支原體污染的 99% 以上。絕大多數支原體污染集中于前 8 種。因此非常適合于與細胞生物學(xué)相關(guān)的科研實(shí)驗室及企業(yè)的日常支原體檢測。
支原體 PCR 檢測試劑盒是優(yōu)選直擴式 PCR 酶擴增支原體基因組中保守 16SrDNA 而設計的，不會(huì )擴增細菌等其他基因組，兼具特異性和高靈敏性的特點(diǎn)，且本試劑盒檢測范圍廣，可檢測：(1)M.Hyorhinis，(2)M.Fermentans，(3)M.Arginini，(4)M. hominis，(5)M. orale，(6)M. salivarium，(7)M.pirum，(8)Acholeplasma Laidlawii，(9)M. agalactiae， (10)M.bovis，(11)M. buccale，(12)M. arthritidis，(13)M. pulmonis 等幾乎所有常見(jiàn)的污染細胞的支原體(注：M.為 Mycoplasma 的縮寫(xiě))。
以上 13 種支原體約占細胞支原體污染的 99% 以上。絕大多數支原體污染集中于前 8 種。因此非常適合于與細胞生物學(xué)相關(guān)的科研實(shí)驗室及企業(yè)的日常支原體檢測。
●高廣譜性，可檢測所有可能含有支原體的樣品
●高靈敏度，可檢測低至 10 copies 的支原體
●高特異性，真核生物、細菌的基因組不會(huì )被檢測
●高保真性，本試劑盒含有陽(yáng)標和陰標，可有效避免 PCR 反應假陰性和假陽(yáng)性
●操作簡(jiǎn)易，本試劑盒的預混體系包含 PCR 反應所需試劑
●耗時(shí)短，本試劑盒能夠在 2 小時(shí)內完成支原體檢測
4.2 支原體污染的解決方式
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）支原體預防劑
支原體預防試劑適合細胞支原體感染的預防，不僅可用于預防環(huán)境和體系可能造成的支原體交叉污染，還可應用于防止支原體污染的復發(fā)。
本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了上百種細胞的測試和長(cháng)期的實(shí)驗驗證，只需 1-3 天就可以顯著(zhù)抑制支原體生長(cháng)，對細胞生長(cháng)幾乎無(wú)影響，兼具高效與溫和清除細胞污染物的特點(diǎn)，大程度上挽救您的細胞。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）支原體清除劑（三款）：
支原體高效清除劑、支原體清除劑、支原體清除劑 plus
支原體高效清除劑、支原體清除劑、支原體清除劑 plus
支原體清除劑適合支原體污染嚴重的細胞，不僅可用于細胞株，還可應用于“脆弱”和易變形的細胞，如各類(lèi)原代細胞、干細胞、上皮樣細胞系，不僅可以顯著(zhù)清除支原體污染，還具有消除細菌污染的能力。
支原體清除劑有三種，分別是支原體清除劑、支原體高效清除劑、支原體清除劑 plus。
支原體溫和清除劑：溫和、高效清除支原體，對細胞生長(cháng)幾乎無(wú)影響，覆蓋所有細胞類(lèi)型。
支原體溫和清除劑：溫和、高效清除支原體，對細胞生長(cháng)幾乎無(wú)影響，覆蓋所有細胞類(lèi)型。
支原體清除劑：適合支原體污染非常嚴重，產(chǎn)生較強耐藥性的細胞支原體清除。
支原體清除劑 plus：適用于支原體污染非常嚴重、有*耐藥性且污染多種支原體的情況，此情況較為少見(jiàn)。
本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了上百種細胞的測試和長(cháng)期的實(shí)驗驗證，只需 1-3 天就可以顯著(zhù)抑制支原體生長(cháng)， 2 周左右即可清除支原體污染，兼具快速和高效清除細胞污染物的特點(diǎn)，大程度上挽救您的細胞。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）支原體清除服務(wù)
① 根據客戶(hù)提供的細胞名稱(chēng)、細胞代次、細胞類(lèi)型制定細胞的支原體清除方案；
② 細胞 STR 鑒定；
③ 支原體 PCR 高敏法檢測支原體污染程度；
④ 細胞的支原體清除。一般污染單一支原體的清除時(shí)間為 2 周左右，感染多種支原體且非常嚴重的細胞，清除時(shí)間需要延長(cháng)，約 3-4 周左右；
⑤ 2 周后，再次進(jìn)行支原體檢測，如果細胞支原體清除干凈，將換為 iCell 預防支原體方案，繼續一周左右時(shí)間；如未清除干凈，適當延長(cháng) 1-2 周清除頑固支原體，1-2 周后再次進(jìn)行復檢。
支原體清除案例
如上圖 1 所示，左側為支原體污染的 MCF-7（100X） 細胞，右側為支原體清除后的 MCF-7 細胞，倒置顯微鏡下可明顯看出細胞間隙間黑點(diǎn)明顯減少，細胞邊緣清晰，狀態(tài)良好。
如上圖 2 所示，左側為支原體污染的 Hep G2 （200X）細胞，右側為支原體清除試劑處理的Hep G2 細胞。左側有支原體污染的細胞樣品可以觀(guān)察到細胞核周?chē)⒘罨蚪z狀藍色熒光。
支原體污染嚴重的細胞可以觀(guān)察到大量微粒狀或絲狀藍色熒光。右側細胞支原體污染被清除干凈，僅觀(guān)察到細胞核的藍色熒光，證明支原體已被清除干凈。
如上圖 2 所示，左側為支原體污染的 Hep G2 （200X）細胞，右側為支原體清除試劑處理的Hep G2 細胞。左側有支原體污染的細胞樣品可以觀(guān)察到細胞核周?chē)⒘罨蚪z狀藍色熒光。
支原體污染嚴重的細胞可以觀(guān)察到大量微粒狀或絲狀藍色熒光。右側細胞支原體污染被清除干凈，僅觀(guān)察到細胞核的藍色熒光，證明支原體已被清除干凈。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）實(shí)驗室除菌衛士
實(shí)驗室衛士為高效廣譜除菌劑，具有廣譜殺菌性，能有效阻止真菌（和孢子），細菌（和孢子），支原體和病毒（包括 HIV 和 Hepatitis B）的生長(cháng)和污染，去除效率能夠達到99.999 %，不含汞、甲醛、ben酚或酒精等刺激性物質(zhì)，無(wú)毒、無(wú)刺激性氣味、可生物降解、不染色衣服、可消除氣味。
對一般的工作臺和器材表面（包括不銹鋼材質(zhì)）沒(méi)有任何損傷，不損傷漆面光澤，不會(huì )使塑料老化，培養箱、超凈工作臺、生物安全柜、細胞培養和分子生物學(xué)實(shí)驗室均可使用。
對一般的工作臺和器材表面（包括不銹鋼材質(zhì)）沒(méi)有任何損傷，不損傷漆面光澤，不會(huì )使塑料老化，培養箱、超凈工作臺、生物安全柜、細胞培養和分子生物學(xué)實(shí)驗室均可使用。
實(shí)驗室衛士的殺菌范圍依賴(lài)噴灑時(shí)間，15 秒內可滅活：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、沙門(mén)氏菌、假絲酵母菌；
30 秒內可滅活：青霉菌、曲霉菌；
60 秒內可滅活：綠膿桿菌；
30 分鐘內可滅活：支原體、衣原體、金黃色葡萄球菌、埃希氏菌、假單胞菌、克雷伯氏菌、假絲酵母菌；30 分鐘可破壞：曲霉菌（包括黑曲霉）、艾滋病毒，乙型肝炎病毒。
30 秒內可滅活：青霉菌、曲霉菌；
60 秒內可滅活：綠膿桿菌；
30 分鐘內可滅活：支原體、衣原體、金黃色葡萄球菌、埃希氏菌、假單胞菌、克雷伯氏菌、假絲酵母菌；30 分鐘可破壞：曲霉菌（包括黑曲霉）、艾滋病毒，乙型肝炎病毒。
本品為即用型噴霧，直接使用即可。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）水浴鍋除菌劑
水浴鍋除菌劑是針對水浴環(huán)境的高效抗菌劑，能夠有效殺滅細菌、真菌、支原體，保持細胞水浴的無(wú)菌狀態(tài)。
水浴鍋、水浴搖床是細胞污染源之一，使用本產(chǎn)品能夠有效清除和抑制革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、支原體等易在水中滋生的微生物生長(cháng)，有效防止細胞污染。
水浴鍋、水浴搖床是細胞污染源之一，使用本產(chǎn)品能夠有效清除和抑制革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、支原體等易在水中滋生的微生物生長(cháng)，有效防止細胞污染。
好物推薦-鏡像綺點(diǎn)（iCell）細胞培養箱水盤(pán)除菌劑
CO2 培養箱在細胞培養中普遍使用，由于半敞開(kāi)式的培養瓶中培養基的滲漏，高濕度及適宜溫度為培養箱中微生物滋生提供條件，所以要提前預防，避免污染源出現。
細胞培養箱水盤(pán)除菌劑是 CO2 培養箱水盤(pán)的消毒劑，可有效殺滅支原體、細菌、酵母菌和真菌，建議每 2 周或至少 1 個(gè)月，進(jìn)行一次系統地清潔和消毒培養箱，可去除培養過(guò)程中的潛在污染源。
細胞培養箱水盤(pán)除菌劑是 CO2 培養箱水盤(pán)的消毒劑，可有效殺滅支原體、細菌、酵母菌和真菌，建議每 2 周或至少 1 個(gè)月，進(jìn)行一次系統地清潔和消毒培養箱，可去除培養過(guò)程中的潛在污染源。
細胞污染不易察覺(jué)，卻是關(guān)乎我們實(shí)驗成敗的大事，越是需要我們日常的認真對待，相信以上對于細胞房常見(jiàn)污染物的鑒別和解決方案的制定，能幫助我們科研工作者解決細胞最重要的問(wèn)題，如果您還是未找到問(wèn)題所在，歡迎您登錄鏡像綺點(diǎn)網(wǎng)站，關(guān)注鏡像綺點(diǎn)，我們期待著(zhù)為您解答。
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