您的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 小鼠腎腺癌細胞的培養方法及注意事項
技術(shù)文章
小鼠腎腺癌細胞的培養方法及注意事項概述如下:
在培養小鼠腎腺癌細胞時(shí),首先需要準備適當的培養基,通常使用的是DMEM(高糖)培養基,并添加10%的胎牛血清(FBS)以及必要的抗生素,如青霉素和鏈霉素(P/S),以防止細菌污染。細胞應在含有95%空氣和5%二氧化碳的培養箱中,于37℃恒溫條件下進(jìn)行培養。
收到細胞后,應首先檢查細胞培養瓶是否破損,培養液是否有漏出或渾濁現象。確認無(wú)誤后,用75%的酒精對培養瓶表面進(jìn)行消毒,然后將培養瓶放入培養箱中靜置24小時(shí),使細胞狀態(tài)穩定。在顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)狀態(tài),當細胞密度達到80%90%時(shí),即可進(jìn)行傳代培養。
傳代時(shí),應先棄去舊的培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS溶液潤洗細胞12次。然后加入適量的胰酶消化液,置于培養箱中消化12分鐘,待細胞大部分變圓并脫落后,加入含血清的培養基終止消化。將細胞懸液離心后,棄去上清液,用新的培養基重懸細胞,并按適當的比例分到新的培養瓶中繼續培養。
在培養過(guò)程中,需要注意定期更換培養基,通常建議每周更換2~3次。同時(shí),應定期觀(guān)察細胞生長(cháng)狀態(tài),記錄細胞形態(tài)、密度等信息。當細胞生長(cháng)至一定數量時(shí),可考慮進(jìn)行凍存,以便后續實(shí)驗使用。
總之,小鼠腎腺癌細胞的培養需要嚴格的無(wú)菌操作、適當的培養條件和定期的觀(guān)察記錄,以確保細胞的健康生長(cháng)和實(shí)驗的順利進(jìn)行。