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技術(shù)文章
STR(ShortTandemRepeat,短串聯(lián)重復序列)鑒定技術(shù)是一種基于DNA分子多態(tài)性的遺傳分析方法,通過檢測特定基因座上短串聯(lián)重復序列的重復次數(shù)差異,實現(xiàn)個體或細胞系的精準識別。其核心原理在于:STR序列由2-6個堿基組成的核心單元串聯(lián)重復,不同個體或細胞系在同一基因座的重復次數(shù)存在差異,形成獨特的“遺傳指紋”。技術(shù)流程包括DNA提取、PCR擴增特定STR位點、電泳分離擴增產(chǎn)物,最終通過條帶位置確定重復次數(shù),生成分型數(shù)據(jù)。
在人肝癌細胞研究中,STR鑒定技術(shù)具有雙重價值:
細胞系身份驗證:肝癌細胞系(如MHCC97-H、HCCLM3)在傳代過程中易發(fā)生交叉污染或標記錯誤。通過檢測21個人類STR位點(如TH01、D5S818等),可與ATCC等數(shù)據(jù)庫比對,確認細胞系來源及純度。例如,HCCLM3細胞系經(jīng)STR鑒定后,可排除HeLa等常見污染細胞,確保實驗材料準確性。
遺傳穩(wěn)定性監(jiān)測:肝癌細胞系在長期培養(yǎng)中可能發(fā)生遺傳漂變。定期STR檢測可追蹤特定基因座重復次數(shù)變化,判斷細胞是否保持原始遺傳特征。例如,MHCC97-H細胞系通過STR分型確認其高轉(zhuǎn)移性亞群(SP細胞)的遺傳穩(wěn)定性,為肝癌轉(zhuǎn)移機制研究提供可靠模型。
此外,STR技術(shù)還應用于肝癌細胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制。在CAR-T細胞治療中,通過STR鑒定可驗證供體細胞與治療產(chǎn)品的遺傳一致性,避免免疫排斥風險。其高靈敏度(聯(lián)合16個位點識別率達99.9999999998%)與標準化流程,使其成為肝癌基礎(chǔ)研究、藥物篩選及細胞治療領(lǐng)域的工具。