人胚腎細胞293T來(lái)源于以腺病毒5DNA進(jìn)行轉化的腎細胞，適于滴定人腺病毒。細胞表達一種不尋常的由整聯(lián)蛋白beta-1亞基和玻聯(lián)蛋白alpha-v亞基組成的玻聯(lián)蛋白細胞表面受體。Ad5插入片段進(jìn)行了克隆和測序，結果表明堿基1-4344插入到了19號染色體(19q13.2)。293細胞比較容易轉染，是一個(gè)很常用的表達研究外源基因的細胞株。293細胞的缺陷是生長(cháng)過(guò)程中貼壁強度比較小。所以在實(shí)驗過(guò)程中容易流失，從而影響實(shí)驗結果。
 

　　人胚腎細胞293T用于納米Fe3O4/Cr(Ⅵ)復合物對大腸桿菌及人胚腎細胞的毒性研究。以Cr(Ⅵ)為典型重金屬污染物的代表，利用納米四氧化三鐵吸附水中Cr(Ⅵ)，選擇大腸桿菌E.coli和人胚腎細胞HEK293兩種不同層級的生物作為模型，研究磁性納米四氧化三鐵吸附Cr(Ⅵ)離子后的復合物對兩種生物產(chǎn)生的毒性效應。本研究的濃度作用范圍如下:MNPs濃度為250μg/mL，Cr(Ⅵ)濃度分別為1、2、3μg/mL，MNPs吸附不同濃度Cr(Ⅵ)后的MNPs/Cr(Ⅵ)復合物，作用時(shí)間為24h。
 

　　1、本研究采用共沉淀法，合成了納米四氧化三鐵顆粒(MNPs)，并利用MNPs吸附水中的Cr(Ⅵ)，制備了MNPs/Cr(Ⅵ)復合物。研究發(fā)現，MNPs能夠有效的吸附水中的Cr(Ⅵ)離子;MNPs對Cr(Ⅵ)的吸附符合Langmuir模型。MNPs/Cr(Ⅵ)復合物呈球形，顆粒大小一致，分布均勻，單分散性好，性質(zhì)比較穩定。
 

　　2、在本研究的濃度范圍和作用時(shí)間下，Cr(Ⅵ)對大腸桿菌E.coli具有明顯的毒性效應，并且與Cr(Ⅵ)濃度呈劑量相關(guān)性。在Cr(Ⅵ)離子的作用下，E.coli的生長(cháng)受到明顯的抑制，Cr(Ⅵ)能夠引起E.coli內活性氧顯著(zhù)升高，并導致氧化損傷，使細胞結構嚴重受損。MNPs及MNPs/Cr(Ⅵ)復合物對E.coli沒(méi)有顯著(zhù)的毒性效應。
 

　　與空白組比較，生長(cháng)曲線(xiàn)沒(méi)有出現明顯的變化，在MNPs、MNPs/Cr(Ⅵ)復合物作用下，E.coli內活性氧略微升高，但并未導致明顯的氧化損傷。通過(guò)透射電鏡觀(guān)察到僅有少量的MNPs、MNPs/Cr(Ⅵ)復合物吸附在大腸桿菌的表面，但細胞膜的通透性及細胞結構沒(méi)有發(fā)生明顯變化。MNPs/Cr(Ⅵ)復合物在LB培養基中都是帶負電的顆粒，且水合粒徑都在200nm左右，導致MNPs/Cr(Ⅵ)復合物沒(méi)有進(jìn)入到大腸桿菌細胞內，僅有少量的MNPs/Cr(Ⅵ)復合物吸附在大腸桿菌表面，盡管產(chǎn)生了少量的活性氧，但不足以導致細胞代謝失衡。因此，MNPs及MNPs/Cr(Ⅵ)復合物對E.coli沒(méi)有產(chǎn)生明顯的毒性效應。
 

　　3、在本研究的濃度范圍和作用時(shí)間下，Cr(Ⅵ)對人胚腎細胞HEK293的毒性效應顯著(zhù)，并且與Cr(Ⅵ)濃度劑量相關(guān)。在Cr(Ⅵ)離子的作用下，細胞的形態(tài)和密度都發(fā)生了顯著(zhù)變化，細胞活力明顯下降，同時(shí)引起細胞內活性氧顯著(zhù)升高，導致氧化損傷，并誘導了細胞的凋亡。在MNPs、MNPs/Cr(Ⅵ)復合物的作用下，與空白組相比，細胞的形態(tài)、密度和細胞活力均沒(méi)有出現明顯的變化。
 

　　MNPs吸附Cr(Ⅵ)后，顯著(zhù)降低了Cr(Ⅵ)對HEK293細胞誘導產(chǎn)生的破壞作用，MNPs/Cr(Ⅵ)復合物沒(méi)有引發(fā)細胞的氧化損傷，證實(shí)了細胞膜和細胞結構沒(méi)有受到明顯的破壞。在DMEM培養基中，由于MNPs/Cr(Ⅵ)復合物的水合粒徑基本都在200～400nm之間，且表面電荷都是帶負電，導致絕大多數的復合物不能進(jìn)入細胞內，MNPs/Cr(Ⅵ)復合物在HEK293細胞內的攝取量極小，這些顆粒是從細胞外通過(guò)質(zhì)膜內陷形成囊泡進(jìn)入細胞，但沒(méi)有進(jìn)入到細胞核中，在正常代謝途徑下不會(huì )導致細胞的凋亡。因此，MNPs及MNPs/Cr(Ⅵ)復合物對HEK293細胞沒(méi)有顯著(zhù)毒性效應。