大鼠心肌細胞H9C2是原始克隆細胞系的亞克隆，該細胞系由Kimes.和Brandt.從胚胎BD1X大鼠心臟組織獲得，并顯示出骨骼肌的許多特性。這個(gè)細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應。如果培養基中的血清濃度下降到1%，融合發(fā)生得很快。

　　

　　大鼠心肌細胞H9C2用于大鼠心肌細胞Hsp60/Hsp10的表達及抗熱應激損傷機理研究。

　　

　　通過(guò)對大鼠和離體培養的鼠源H9C2心肌細胞進(jìn)行不同時(shí)間的熱應激處理,擬動(dòng)態(tài)觀(guān)察和了解熱應激大鼠心肌細胞中Hsp60及其相應mRNA的轉錄和表達水平,以及Hsp60在體內、外心肌細胞中的定位和分布等特點(diǎn),研究熱應激過(guò)程中Hsp60的變化規律與大鼠心肌細胞熱應激損傷的相關(guān)性,探討Hsp60的組織細胞保護機制。

　　

　　為研究熱應激對體內、外大鼠心肌細胞造成的應激性損傷及其程度,本試驗通過(guò)病理學(xué)檢測,觀(guān)察了受試大鼠心肌細胞和鼠源H9C2心肌細胞在遭受不同時(shí)間的熱應激處理后所呈現的應激性損傷變化。試驗結果顯示,熱應激處理初期,受試大鼠的呼吸頻率加快,被毛粗亂,煩躁不安,隨后大量出汗,俯臥少動(dòng)。待熱應激處理至60min時(shí)出現大鼠的熱應激猝死,熱應激處理100min后,50%的受試大鼠猝死,熱應激處理2h內,100%的受試大鼠發(fā)生猝死;離體培養的H9C2心肌細胞在遭受熱應激的時(shí)間達60min時(shí),細胞的活力和存活率開(kāi)始顯著(zhù)下降,熱應激處理240min后,約50%的H9C2大鼠心肌細胞死亡。

　　

　　說(shuō)明離體培養的大鼠心肌細胞H9C2對熱應激的耐受時(shí)間更長(cháng);組織病理學(xué)結果顯示,熱應激處理20min后大鼠心肌細胞腫脹,心肌細胞質(zhì)渾濁,呈現明顯的顆粒變性。熱應激處理40min組大鼠的部分心肌細胞發(fā)生明顯的顆粒變性,細胞質(zhì)嗜酸性顯著(zhù)增強。熱應激處理至100min組大鼠的心肌細胞斷裂較為明顯,心肌細胞核濃縮;細胞病理學(xué)結果顯示,20min熱應激處理組H9C2大鼠心肌細胞的體積腫大,形態(tài)變圓,細胞漿內出現少量的紅染顆粒。40min熱應激處理組心肌細胞的胞漿內出現較多的紅染顆粒。60min熱應激處理組H9C2大鼠心肌細胞出現脫落現象,細胞形態(tài)變圓且細胞邊緣出現不規則的突起,細胞體積顯著(zhù)變大,胞漿內出現大量密集分布的紅染顆粒。

　　

　　熱應激導致的大鼠心肌細胞和離體培養鼠源大鼠心肌細胞H9C2的病理學(xué)變化均隨著(zhù)熱應激處理時(shí)間的延長(cháng)而加劇,但離體培養心肌細胞表現出更強的熱應激耐受性。為研究動(dòng)物心肌細胞內Hsp60表達變化在熱應激性心肌損傷以及動(dòng)物猝死中的作用,本試驗通過(guò)熱應激過(guò)程中體內、外大鼠心肌細胞中Hsp60及其相應mRNA的表達水平和在細胞的定位等進(jìn)行了動(dòng)態(tài)觀(guān)察,并對Hsp60表達改變與心肌的熱應激損傷的相關(guān)性進(jìn)行了比較分析。