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小鼠小膠質(zhì)BV2“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數/100個(gè)細胞。一般細胞分裂指數介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%。接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力好時(shí)期,稱(chēng)指數增生期(對數生長(cháng)期),適宜進(jìn)行各種試驗。

收到小鼠小膠質(zhì)BV2后要如何處理?
1、首先,觀(guān)察細胞培養瓶是否完好。培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時(shí)與致備技術(shù)支持聯(lián)系。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察紐胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題,部分貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養蓋,將細胞置于細胞培養箱靜置培2-4小時(shí),以便穩定細胞狀態(tài)。
3、仔細讀細胞說(shuō)明書(shū),了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、如收到的細胞沒(méi)有相關(guān)培養經(jīng)驗,建議消化時(shí)在顯微鏡下實(shí)時(shí)觀(guān)察消化情況,掌握細胞的最佳消化時(shí)間,若3分鐘內無(wú)法脫落的細胞,可以在37℃條件下提高胰酶活性,適當延長(cháng)時(shí)間,從加入胰酶到終止消化的過(guò)程,所有操作都要迅速。
5、建議收到細胞后的一次傳代比例為1/2最多不要超過(guò)1/3。
6、若小鼠小膠質(zhì)BV2拉絲、黏連則說(shuō)明消化過(guò)度,建議適當縮短消化時(shí)間,若發(fā)現僅有一半細胞先脫落,則可以?xún)?yōu)先終止,剩下的繼續消化。