LNCAP 人前列腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）介紹

人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長(cháng)調節子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應。這株細胞并不形成*的單層，而是形成集落，在傳代時(shí)可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。生長(cháng)很慢，傳代后48小時(shí)內不應擾動(dòng)。當培養瓶封包后，多數細胞從培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到后，在通常培養單層細胞的條件下培養24到48小時(shí)，以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。如果需要，培養瓶?jì)热菸锟梢允占?00g離心15分鐘，以10毫升培養液重懸并培養到一個(gè)單獨的培養瓶中。請使用Corning的Cellbind培養瓶培養。

細胞特性
1） 來(lái)源：前列腺；左鎖骨淋巴結癌轉移灶
2） 形態(tài)：上皮細胞樣
3） 含量：>1x106 個(gè)/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長(cháng)，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染，請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。

LNCAP 人前列腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）用途：僅供科研使用。

細胞接受后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3） 棄去T25瓶中的培養基，添加6ml新的*培養基。

4） 如果細胞長(cháng)滿(mǎn)（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代。

5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時(shí)與我們取得聯(lián)系。

細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二．T24 人膀胱癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(diǎn)（iCell）處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。

細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。

鏡像綺點(diǎn)（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：

一、原代細胞服務(wù)
      各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源；
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
      原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等；
      原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗外包服務(wù)；

二、細胞株/系服務(wù)
      細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)；
      細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導；
      細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等；

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養（有滋養層or無(wú)滋養層在）；
      iPS細胞增殖及冷凍保存；
      iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習；
      新藥及實(shí)驗儀器上市前評估；

四、技術(shù)外包服務(wù)：各類(lèi)細胞生物學(xué)實(shí)驗、分子生物學(xué)實(shí)驗、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他：根據客戶(hù)需要定制服務(wù)等

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