GH3 大鼠垂體瘤細胞/鏡像綺點(diǎn)（iCell）介紹

GH3細胞系是由Tashjian AH等在1965年7月從一只7月齡的雌性Wistar-Furth大鼠的垂體腫瘤中分離建立的。GH3細胞系不是直接來(lái)源于GH1細胞系的克隆，而是從原代培養的GH1細胞在大鼠身上傳代兩次形成的腫瘤中建立的。上皮樣的GH3細胞比GH1分泌更高水平的生長(cháng)激素，也可產(chǎn)生催乳素。對調控GH3細胞分泌蛋白類(lèi)激素的研究表明，qing化可di松可以刺激生長(cháng)激素的分泌、抑制催乳素的產(chǎn)生。

細胞特性

1） 來(lái)源：大鼠，垂體瘤

2） 形態(tài)：上皮細胞樣，疏松貼壁，有漂浮的細胞簇

3） 含量：>1x106 個(gè)/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續生長(cháng)，傳代達到細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染，請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途：僅供科研使用。

細胞接受后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3） 棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的*培養基。

4） 如果細胞長(cháng)滿(mǎn)（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。

5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時(shí)與我們取得聯(lián)系。

細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備F12K培養基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，2.5%；HS，15%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。

二． GH3 大鼠垂體瘤細胞/鏡像綺點(diǎn)（iCell）處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過(guò)夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。懸浮細胞凍存時(shí)，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

鏡像綺點(diǎn)（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹：

       一、原代細胞服務(wù)：
              各類(lèi)模式哺乳動(dòng)物的多種原代細胞資源
              多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
              原代細胞分離和培養相關(guān)試劑、kit、培養基添加劑等
              原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實(shí)驗外包服務(wù)

       二、細胞系服務(wù)：
              細胞株/系培養、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū)
              細胞系培養過(guò)程的技術(shù)指導
              細胞系培養基、添加劑、血清及相關(guān)生長(cháng)因子、試劑等

       三、iPS細胞服務(wù)：
              iPS細胞基礎培養（有滋養層or無(wú)滋養層）
              iPS細胞增殖及冷凍保存
              iPS基礎培養技術(shù)實(shí)習
              新藥及實(shí)驗儀器上市前評估

       四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶(hù)定制服務(wù)等

鏡像綺點(diǎn)（上海）細胞技術(shù)有限公司

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